珈創(chuàng)生物 —— 生物技術(shù)服務(wù)與研發(fā)為一體的高新技術(shù)企業(yè)
優(yōu)質(zhì)高效透明
High quality, efficient and transparent
中國(guó)藥典要求對(duì)細(xì)胞系進(jìn)行檢定，NMPA、FDA、EMA、世界衛(wèi)生組織（WHO） 和人類(lèi)用藥注冊(cè)技術(shù)要求協(xié)調(diào)國(guó)際會(huì)議（ICH）的各種法規(guī)文件概述了對(duì)細(xì)胞庫(kù)檢定的要求和指導(dǎo)，以確認(rèn)細(xì)胞的起源和歷史，并鑒定和測(cè)試細(xì)胞的身份，穩(wěn)定性和純度。
細(xì)胞檢定主要包括幾個(gè)方面：細(xì)胞鑒別、無(wú)菌檢查、支原體檢查、內(nèi)外源病毒因子檢查、成瘤性/致瘤性檢查等。
這些檢測(cè)項(xiàng)目對(duì)于 MCB 細(xì)胞和 WCB 細(xì)胞及生產(chǎn)限定代次細(xì)胞均適用。
我們建議在藥物生產(chǎn)的各個(gè)階段對(duì)哺乳動(dòng)物和非哺乳動(dòng)物細(xì)胞系進(jìn)行檢定，包括：
主細(xì)胞庫(kù)（MCB） 工作細(xì)胞庫(kù)（WCB） 生產(chǎn)終末細(xì)胞（EOPC） 病毒種子庫(kù)（VSS） 原材料及最終產(chǎn)品
細(xì)胞系檢測(cè)
細(xì)胞鑒別試驗(yàn)
新建細(xì)胞系/株、細(xì)胞庫(kù)和生產(chǎn)終末細(xì)胞應(yīng)進(jìn)行鑒別試驗(yàn)，以確定為本細(xì)胞，且無(wú)其他細(xì)胞的交叉污染。珈創(chuàng)生物提供多種鑒別試驗(yàn)，客戶可選擇一種或多種方法對(duì)其細(xì)胞系/株進(jìn)行種屬鑒別。
染色體核型分析
核型分析的結(jié)果可以確認(rèn)樣品的細(xì)胞系身份和來(lái)源物種。我們擁有多種細(xì)胞（包括人源細(xì)胞，人源干細(xì)胞，猴 Vero，倉(cāng)鼠 CHO）核型細(xì)胞分析的豐富經(jīng)驗(yàn)。
染色體核型分析包括但不限于：中期染色體 G 顯帶分析和染色體計(jì)數(shù)（提供二倍體染色體數(shù)，頻率分布和多倍體水平）。
同工酶試驗(yàn)
對(duì)細(xì)胞乳酸脫氫酶（LD）、6-磷酸葡萄糖脫氫酶（G6PD）和核苷磷酸化酶 （NP）三種酶分別進(jìn)行凝膠電泳試驗(yàn)，并通過(guò)與指示細(xì)胞對(duì)比，確定有無(wú)交叉污染。
短串聯(lián)重復(fù)序列分析(STR)
STR（短串聯(lián)重復(fù)序列）分析法即通過(guò)提取樣品 DNA，PCR 擴(kuò)增 STR 位點(diǎn)， PCR 產(chǎn)物檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果分析，并與 ATCC 和 DSMZ 數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì)，以確定樣品種屬來(lái)源，判斷其是否存在其他人源細(xì)胞交叉污染。
無(wú)菌檢查
參考中國(guó)藥典通則 1101，提供符合法規(guī)要求的薄膜過(guò)濾法和直接接種法。無(wú)菌檢查均在 A 級(jí)隔離器或 C+A 級(jí)環(huán)境中進(jìn)行，且在檢測(cè)過(guò)程中持續(xù)進(jìn)行環(huán)境監(jiān)測(cè)。
適用性檢查：均可按照法規(guī)的要求，對(duì)不同的供試品進(jìn)行適用性試驗(yàn)。 以確認(rèn)所采用的方法適合供試品的無(wú)菌檢查。
薄膜過(guò)濾法：采用封閉式薄膜過(guò)濾器，可過(guò)濾大量供試品以及利于解決供試品中可能存在微生物生長(zhǎng)抑制劑等問(wèn)題。是可過(guò)濾供試品首選的檢測(cè)方法。
直接接種法：適用于無(wú)法用薄膜過(guò)濾法進(jìn)行檢測(cè)的供試品，包括混懸液等非澄清水溶液、固體供試品、非水溶性供試品和滅菌醫(yī)療器械等。
分枝桿菌檢查
珈創(chuàng)生物參考中國(guó)藥典通則 1101，采用 Middlebrook 7H10 平板培養(yǎng)法，提供符合法規(guī)要求的分枝桿菌檢查。檢查均在A級(jí)隔離器或C+A級(jí)環(huán)境中進(jìn)行，且在檢測(cè)過(guò)程中持續(xù)進(jìn)行環(huán)境監(jiān)測(cè)。
支原體檢查
珈創(chuàng)生物參考中國(guó)藥典通則 3301，提供符合法規(guī)要求的支原體檢查包括培養(yǎng)法和指示細(xì)胞培養(yǎng)法（DNA 染色法）。
培養(yǎng)法：供試品分別接種固體和液體培養(yǎng)基，于接種一周后取液體培養(yǎng)基轉(zhuǎn)種進(jìn)行次代培養(yǎng)，觀察初代培養(yǎng)和次代培養(yǎng)結(jié)果。
指示細(xì)胞培養(yǎng)法（DNA 染色法）：供試品接種于對(duì)照細(xì)胞，培養(yǎng) 3-5 天后傳代再培養(yǎng) 3-5 天，于培養(yǎng)期末進(jìn)行染色觀察。
內(nèi)外源病毒污染檢查
檢查細(xì)胞系/株中是否有來(lái)源物種中潛在的可傳染的病毒，以及由于使用的原 材料或操作帶入的外源性病毒。細(xì)胞進(jìn)行病毒檢查的種類(lèi)及方法，須根據(jù)細(xì)胞種屬來(lái)源、組織來(lái)源、細(xì)胞特性、傳代歷史、培養(yǎng)方法及過(guò)程等確定。 在您開(kāi)展檢測(cè)前，珈創(chuàng)愿意與您進(jìn)行充分的溝通，確定合適的檢測(cè)方案。
細(xì)胞形態(tài)觀察及血吸附試驗(yàn)
體外不同指示細(xì)胞接種培養(yǎng)法
動(dòng)物體內(nèi)接種法
乳鼠腦內(nèi)及腹腔接種法
小鼠腦內(nèi)及腹腔接種法
豚鼠腹腔接種法
家兔皮內(nèi)及皮下接種法
雞胚接種法
雞胚卵黃囊接種法
雞胚尿囊腔接種及尿囊液血凝試驗(yàn)
逆轉(zhuǎn)錄病毒檢測(cè)
逆轉(zhuǎn)錄酶活性測(cè)定法 PERT
感染性試驗(yàn)
透射電鏡觀察法
種屬特異性外源病毒因子檢測(cè)
應(yīng)根據(jù)細(xì)胞系/株種屬來(lái)源、組織來(lái)源及供體健康狀況等確定檢測(cè)病毒的種類(lèi)。
鼠源細(xì)胞系
鼠源病毒檢查
人源細(xì)胞系/株
人源病毒檢測(cè)Q-PCR法
牛源性病毒檢測(cè)
細(xì)胞培養(yǎng)法
熒光抗體檢測(cè)法
豬源性病毒檢測(cè)
細(xì)胞培養(yǎng)法
普通PCR法
Q-PCR法
其他特定病毒檢測(cè)
鼠細(xì)小病毒檢測(cè)
細(xì)胞培養(yǎng)法
普通PCR法
Q-PCR法
杯狀病毒（Vesivirus 2117）檢測(cè)--Q- PCR法 CHO細(xì)胞系
成瘤性檢查
動(dòng)物體內(nèi)接種法（裸鼠）
軟瓊脂克隆形成試驗(yàn)
