2020版中國(guó)藥典（ChP）雖然并未收錄NAT法作為支原體檢測(cè)方法，但其中也提到了“也可采用經(jīng)國(guó)家藥品檢定機(jī)構(gòu)認(rèn)可的其他方法”。傳統(tǒng)的培養(yǎng)法和DNA染色法雖然有著自身的優(yōu)點(diǎn)，但較長(zhǎng)的檢測(cè)周期和較大的樣品檢測(cè)用量逐漸不能滿足行業(yè)快速發(fā)展的需求。NAT方法從當(dāng)前支原體快速檢測(cè)方法中脫穎而出，已經(jīng)被美國(guó)藥典、歐洲藥典和日本藥典收錄，并明確提到NAT方法在經(jīng)過適當(dāng)驗(yàn)證后，可用于檢測(cè)方法補(bǔ)充或替代藥典方法進(jìn)行放行檢測(cè)。

下表為傳統(tǒng)的支原體檢測(cè)方法單次檢測(cè)對(duì)應(yīng)樣品量和檢測(cè)周期：

相對(duì)于傳統(tǒng)方法，Q-PCR方法只需要很少的樣品量（視靈敏度調(diào)整，按USP示例，最少可為0.2ml），若結(jié)果為陰性最快可以在24h內(nèi)匯報(bào)結(jié)果。但是容易受到其他因素干擾導(dǎo)致出現(xiàn)“假陽(yáng)性、假陰性”結(jié)果，所以針對(duì)該方法的驗(yàn)證工作極為重要。NMPA于2017年發(fā)布了《細(xì)胞治療產(chǎn)品研究與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則》，提出可以采用快速、微量的新型檢測(cè)方法。研究者應(yīng)對(duì)新型檢驗(yàn)方法與傳統(tǒng)檢測(cè)方法進(jìn)行比較和評(píng)估，必要時(shí)，在產(chǎn)品放行檢驗(yàn)時(shí)可以采用兩種檢驗(yàn)方法進(jìn)行相互驗(yàn)證。

對(duì)于如何進(jìn)行NAT方法的驗(yàn)證，目前歐洲藥典<2.6.7>和日本藥典里都詳細(xì)介紹，其內(nèi)容基本一致。中檢院也發(fā)表了文章《支原體檢查的核酸檢測(cè)方法及方法學(xué)驗(yàn)證的思考》，以期對(duì)我國(guó)支原體核酸擴(kuò)增法檢測(cè)的研發(fā)者及使用者提供借鑒。支原體NAT法須進(jìn)行專屬性（Specificity）、檢測(cè)限（Detection Limit）和耐用性（Robustness）驗(yàn)證。

● 2020版中國(guó)藥典三部《生物制品生產(chǎn)檢定用動(dòng)物細(xì)胞基質(zhì)制備及質(zhì)量控制》中提出對(duì)于生產(chǎn)用細(xì)胞，需要對(duì)主細(xì)胞庫(kù)（MCB）、工作細(xì)胞庫(kù)（WCB）、生產(chǎn)終末細(xì)胞（EOPC）進(jìn)行支原體檢查；通則9201 藥品微生物檢驗(yàn)替代方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則

● 《免疫細(xì)胞治療產(chǎn)品藥學(xué)研究與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）》中建議在關(guān)鍵時(shí)間點(diǎn)對(duì)適合的中間樣品開展支原體等安全性相關(guān)檢測(cè)或采取相關(guān)的措施加以控制，并且支原體同樣需要作為終產(chǎn)品的放行檢項(xiàng)

● FDA,Guidance for Industry:Characterization and Qualification of Cell Substrates and Other Biological Materials Used in the Production of Viral Vaccines for Infectious Disease Indications，中提出對(duì)于原材料、病毒種子、未加工的收獲液等都需要進(jìn)行支原體控制

●  EP 10.0 2.6.7 Validation of nucleic acid amplificationtechniques (NAT) for the detection of mycoplasmas: guidelines