干貨|CAR-T產品質量控制與國內外法規梳理

T細胞是人體免疫系統的主力軍，負責攻擊并清除腫瘤細胞，維護人體健康，但腫瘤細胞會通過不斷變異獲得一層偽裝，讓T細胞誤認它是正常細胞，進而逃脫T細胞的“攻擊”而不斷繁殖擴散，如果能讓T細胞練就“火眼金睛”，看破腫瘤細胞的偽裝，重新識別并將其清除，則能達到治療的目的，在這一思路下，CAR-T細胞免疫療法應運而生。

嵌合抗原受體 T 細胞（CAR-T，Chimeric antigen receptor T cell）是指通過基因修飾技術將帶有特異性抗原識別結構域及 T 細胞激活信號的遺傳物質轉入 T細胞，也就是給T細胞裝上定位導航裝置CAR，使 T 細胞通過直接與腫瘤細胞表面的特異性抗原相結合而激活。T 細胞識別腫瘤細胞后，通過分泌穿孔素、顆粒酶素 B 等直接殺傷腫瘤細胞，表達TNF（腫瘤壞死因子）配體誘導腫瘤細胞凋亡，并通過分泌細胞因子募集人體內源性免疫細胞去殺傷腫瘤細胞，從而達到治療腫瘤的目的；同時，還可形成免疫記憶 T 細胞從而獲得特異性的抗腫瘤長效機制。

目前該療法在全球研發非常火熱，根據clinicaltrial.gov 網站數據，全球共有800項CAR-T細胞臨床試驗，中國446項。

CAR構建體通常通過病毒載體引入T細胞。通常使用的載體是逆轉錄病毒和慢病毒載體，隨機整合到宿主T細胞基因組中。

下面，我們以慢病毒載體轉導方法為例，來了解CAR-T產品生產過程中需要進行的質量控制。

該生產過程分成三個部分：質粒生產工藝、慢病毒載體生產工藝、CAR-T生產工藝。

簡化過程為：建立符合要求的大腸桿菌生產用種子庫，復蘇后經發酵、收獲、純化得到需要的質粒，再通過3質粒、4質粒系統轉染293T細胞收獲慢病毒載體，經純化后轉染供者的T細胞后得到CAR-T。

CAR-T產品生產中的每個工藝環節都影響最終成品制劑的質量。基于不同的工藝環節都需要開展質量研究、制定質量標準以控制相應的風險，保障最終成品的質量，國內外監管機構對其生產的各個階段均有相應的法規或者指導文件，梳理如下，感興趣的小伙伴可去公眾號后臺回復“CAR-T法規”，下載相關文件原件。

中國相關管理制度與指南

CAR-T產品的各個生產環節均需要進行相應的質量研究并制定質量標準和要求，我們依據相應法規和指導文件進行了如下梳理。